牛血清白蛋白(BSA)常見(jiàn)問(wèn)題
Release Time:2022-10-19牛血清白蛋白(BSA)問(wèn)題簡(jiǎn)介:
※ 牛血清白蛋白(BSA)是一種約66.5kDa的球形血清蛋白。由于其高穩(wěn)定性和對(duì)許多生物反應(yīng)無(wú)干擾,BSA被廣泛應(yīng)用于診斷測(cè)試系統(tǒng)中。典型應(yīng)用包括用作蛋白質(zhì)校準(zhǔn)器、穩(wěn)定劑或阻斷劑。
※ 牛血清白蛋白(BSA)常見(jiàn)問(wèn)題:牛血清白蛋白(BSA)在實(shí)驗(yàn)室中是通用的,可用于蛋白質(zhì)印跡、細(xì)胞組織培養(yǎng)、PCR等,但BSA的多功能性使研究人員提出了許多常見(jiàn)問(wèn)題。6個(gè)關(guān)于BSA的常見(jiàn)問(wèn)題,并提供了BSA非常詳細(xì)的答案可作為大家參考。
1. 實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用什么類(lèi)型的BSA?
在之前關(guān)于這個(gè)主題的文章中,實(shí)際上有更詳細(xì)地討論實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用什么類(lèi)型的 BSA 這個(gè)問(wèn)題。這個(gè)問(wèn)題經(jīng)常出現(xiàn),因?yàn)橛性S多類(lèi)型的BSA可用于廣泛的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,每種 BSA 都具有更好地優(yōu)化實(shí)驗(yàn)室技術(shù)的特性。例如:如果需要阻斷劑,您可能需要無(wú)IgG的BSA。
決定使用哪種 BSA 將基于您正在進(jìn)行的類(lèi)型實(shí)驗(yàn)和您的具體需求。在看了上面提到的文章及其選擇指南表之后,還是可以參考其他來(lái)源,如ResearchGate,以獲得更多信息和更為定制的答案。
2. BSA如何起到阻斷劑的作用?
※ 阻斷劑:旨在防止抗體的非特異性結(jié)合。一般來(lái)說(shuō),只要蛋白質(zhì)對(duì)探針沒(méi)有親和力,理論上它就可以用作封閉劑。但如果你隨機(jī)選擇 BSA,可能會(huì)造成實(shí)驗(yàn)很可能效率低下。因此,有一些特定的 BSA 是針對(duì)這類(lèi)實(shí)驗(yàn)。這些蛋白質(zhì)與膜的結(jié)合更加一致,提高了分析靈敏度,減少了背景干擾。
※ 為什么選擇BSA?首先,你不是隨便要一些 BSA 就可以的。許多類(lèi)型的 BSA含有IgG(當(dāng)然可以有其他應(yīng)用),這可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合。我們的目標(biāo)是選取一種BSA,對(duì)于阻斷劑,尤其是BSA,您需要考慮不含免疫球蛋白的類(lèi)型。
3. 我應(yīng)該用BSA還是 脫脂奶粉 作為阻斷劑?
BSA(牛血清白蛋白)和脫脂奶粉是兩種最常用的阻斷緩沖液,在防止抗體與組織的非特異性結(jié)合方面很重要。
※ 實(shí)驗(yàn)室中最常用的兩種阻斷劑:是脫脂奶粉 和 BSA。每種方法都有利弊。與BSA相比,脫脂奶粉 通常更便宜,更容易從 脫脂奶粉 中提取制備;然而,脫脂奶粉 不適合用于抗生物素-生物素系統(tǒng)中使用,因?yàn)?脫脂奶粉 中含有生物素,牛奶不應(yīng)用于磷酸化蛋白質(zhì)。
※ 通常,當(dāng)使用磷酸化蛋白時(shí),BSA 作為阻斷劑的效果更好。這是因?yàn)槊撝谭壑泻卸喾N蛋白質(zhì),其中一種是磷酸蛋白酪蛋白,這導(dǎo)致了背景干擾更高。使用磷酸化蛋白時(shí),最好的經(jīng)驗(yàn):選取BSA。
4. 為什么蛋白質(zhì)濃度計(jì)算中需要BSA?
為了估算未知樣本的蛋白質(zhì)濃度,您需要將其與您的樣本最相似的蛋白進(jìn)行參考比較。然而,這并不總是容易找到的,所以 BSA 起到了參考作用。有幾個(gè)因素促使選擇 BSA 成為參考:非常豐富,價(jià)格非常低廉,非常穩(wěn)定,不會(huì)對(duì)生化反應(yīng)產(chǎn)生巨大影響。
5. 牛血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)是同一回事嗎?
血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)這兩個(gè)產(chǎn)品品完全不一樣。胎牛血清:是真核細(xì)胞培養(yǎng)中常用的血清補(bǔ)充劑。FBS對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的好處是其抗體水平較低,生長(zhǎng)因子水平較高。牛血清白蛋白(BSA):用于多種實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,包括其作為:蛋白質(zhì)濃度標(biāo)準(zhǔn)功能測(cè)定、作為細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)素的功能以及在限制性消化過(guò)程中穩(wěn)定酶的能力。然而,這里重要的一點(diǎn)是,當(dāng)你只尋找其中一個(gè)或另一個(gè)時(shí)產(chǎn)品是,它們經(jīng)常出現(xiàn)在谷歌,百度搜索中出現(xiàn),而且聽(tīng)起來(lái)非常相似。



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