牛血清白蛋白(BSA)常見問題
Release Time:2022-10-19牛血清白蛋白(BSA)問題簡介:
※ 牛血清白蛋白(BSA)是一種約66.5kDa的球形血清蛋白。由于其高穩(wěn)定性和對許多生物反應無干擾,BSA被廣泛應用于診斷測試系統(tǒng)中。典型應用包括用作蛋白質校準器、穩(wěn)定劑或阻斷劑。
※ 牛血清白蛋白(BSA)常見問題:牛血清白蛋白(BSA)在實驗室中是通用的,可用于蛋白質印跡、細胞組織培養(yǎng)、PCR等,但BSA的多功能性使研究人員提出了許多常見問題。6個關于BSA的常見問題,并提供了BSA非常詳細的答案可作為大家參考。
1. 實驗應該使用什么類型的BSA?
在之前關于這個主題的文章中,實際上有更詳細地討論實驗應該使用什么類型的 BSA 這個問題。這個問題經(jīng)常出現(xiàn),因為有許多類型的BSA可用于廣泛的實驗室應用,每種 BSA 都具有更好地優(yōu)化實驗室技術的特性。例如:如果需要阻斷劑,您可能需要無IgG的BSA。
決定使用哪種 BSA 將基于您正在進行的類型實驗和您的具體需求。在看了上面提到的文章及其選擇指南表之后,還是可以參考其他來源,如ResearchGate,以獲得更多信息和更為定制的答案。
2. BSA如何起到阻斷劑的作用?
※ 阻斷劑:旨在防止抗體的非特異性結合。一般來說,只要蛋白質對探針沒有親和力,理論上它就可以用作封閉劑。但如果你隨機選擇 BSA,可能會造成實驗很可能效率低下。因此,有一些特定的 BSA 是針對這類實驗。這些蛋白質與膜的結合更加一致,提高了分析靈敏度,減少了背景干擾。
※ 為什么選擇BSA?首先,你不是隨便要一些 BSA 就可以的。許多類型的 BSA含有IgG(當然可以有其他應用),這可能導致非特異性結合。我們的目標是選取一種BSA,對于阻斷劑,尤其是BSA,您需要考慮不含免疫球蛋白的類型。
3. 我應該用BSA還是 脫脂奶粉 作為阻斷劑?
BSA(牛血清白蛋白)和脫脂奶粉是兩種最常用的阻斷緩沖液,在防止抗體與組織的非特異性結合方面很重要。
※ 實驗室中最常用的兩種阻斷劑:是脫脂奶粉 和 BSA。每種方法都有利弊。與BSA相比,脫脂奶粉 通常更便宜,更容易從 脫脂奶粉 中提取制備;然而,脫脂奶粉 不適合用于抗生物素-生物素系統(tǒng)中使用,因為 脫脂奶粉 中含有生物素,牛奶不應用于磷酸化蛋白質。
※ 通常,當使用磷酸化蛋白時,BSA 作為阻斷劑的效果更好。這是因為脫脂奶粉中含有多種蛋白質,其中一種是磷酸蛋白酪蛋白,這導致了背景干擾更高。使用磷酸化蛋白時,最好的經(jīng)驗:選取BSA。
4. 為什么蛋白質濃度計算中需要BSA?
為了估算未知樣本的蛋白質濃度,您需要將其與您的樣本最相似的蛋白進行參考比較。然而,這并不總是容易找到的,所以 BSA 起到了參考作用。有幾個因素促使選擇 BSA 成為參考:非常豐富,價格非常低廉,非常穩(wěn)定,不會對生化反應產(chǎn)生巨大影響。
5. 牛血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)是同一回事嗎?
血清白蛋白(BSA)和胎牛血清(FBS)這兩個產(chǎn)品品完全不一樣。胎牛血清:是真核細胞培養(yǎng)中常用的血清補充劑。FBS對細胞培養(yǎng)的好處是其抗體水平較低,生長因子水平較高。牛血清白蛋白(BSA):用于多種實驗室應用,包括其作為:蛋白質濃度標準功能測定、作為細胞營養(yǎng)素的功能以及在限制性消化過程中穩(wěn)定酶的能力。然而,這里重要的一點是,當你只尋找其中一個或另一個時產(chǎn)品是,它們經(jīng)常出現(xiàn)在谷歌,百度搜索中出現(xiàn),而且聽起來非常相似。



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