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香豆素及香豆素衍生物探針
Release Time：2022-03-03香豆素類熒光探針介紹
香豆素和香豆素衍生物是紫外可激發(fā)的藍(lán)色熒光染料，具有短發(fā)射波長，范圍從 ∼390 到 ∼480 nm。 最廣泛使用的香豆素包括 AMCA、7-氨基香豆素的衍生物（AFC 和 AMC）、7-羥基香豆素和 7-甲氧基香豆素，用于制備藍(lán)色熒光肽、蛋白質(zhì)和其他生物分子。 與熒光素、羅丹明和花青相比，香豆素由于其相對(duì)較低的消光系數(shù)而產(chǎn)生適度明亮且光穩(wěn)定的熒光。
藍(lán)色熒光探針最適用于細(xì)胞骨架標(biāo)記等高豐度目標(biāo)的直接成像、細(xì)胞追蹤應(yīng)用、作為檢測酶活性的底物和某些多色熒光應(yīng)用——包括免疫熒光、核酸和蛋白質(zhì)微陣列、原位雜交 和神經(jīng)元追蹤。
香豆素類熒光探針光譜特性：
圖 1. 常用香豆素衍生物 AMCA 的激發(fā)和發(fā)射光譜。
| 單元項(xiàng)目 | 值 |
| Ex/Em (nm): | 376/480 |
| Extinction Coefficient (ε): | 17,000 cm-1M-1 |
| Filter Set: | DAPI |
| Laser Line: | 405 nm laser |
| Quantum Yield (Φ): | 0.53 |
iFluor™ 350 - AMCA 和 Alexa Fluor® 350 的卓越替代品：
iFluor™ 350 染料是一種亮藍(lán)色熒光染料，其光譜與 AMCA 相似，具有更高的水溶性、光穩(wěn)定性和更高的熒光量子產(chǎn)率。 iFluor™ 350 偶聯(lián)物非常適合對(duì)高豐度目標(biāo)進(jìn)行直接成像，尤其適用于多色應(yīng)用，例如流式細(xì)胞術(shù)和超分辨率熒光顯微鏡，而且不會(huì)影響綠色和紅色熒光探針的性能。
圖 2. HeLa 細(xì)胞在 4% 甲醛中固定，然后用 Phalloidin iFluor™ 350 偶聯(lián)物和 Nuclear Orange™ DCS1 染色。
| Fluorophore | Quantum Yield | Extinction Coefficient | Brightness |
| AMCA | 0.53 | 19,000 | x |
| iFluor™ 350 | 0.95 | 20,000 | xx |
香豆素染料產(chǎn)品：
BIOFOUNT提供廣泛的香豆素產(chǎn)品選擇，包括用于標(biāo)記肽、蛋白質(zhì)和其他生物分子的活性染料、偶聯(lián)物、指示劑和用于檢測細(xì)胞、勻漿和溶液中酶活性的底物。
香豆素活性染料:
反應(yīng)性熒光香豆素和香豆素衍生物廣泛用于共價(jià)標(biāo)記生物分子，如抗體、碳水化合物、核酸、蛋白質(zhì)、肽和寡核苷酸。 香豆素偶聯(lián)物產(chǎn)生中等亮度和光穩(wěn)定的藍(lán)色熒光，通常用作檢測酶活性的底物，或在與綠色、黃色或紅色熒光探針結(jié)合時(shí)在多色熒光研究中提供對(duì)比。 香豆素和香豆素衍生物很容易在各種染料標(biāo)記化學(xué)品中獲得，包括：
※ 琥珀酰亞胺酯/NHS 酯 - 用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)、肽、胺修飾寡核苷酸和其他生物分子上的游離胺 (-NH2)
※ 馬來酰亞胺 - 用于標(biāo)記抗體、蛋白質(zhì)和肽上的巰基
※ 疊氮化物 - 用于通過點(diǎn)擊化學(xué)方法標(biāo)記亞乙基
※ 炔烴 - 通過點(diǎn)擊化學(xué)方法標(biāo)記疊氮化物
※ 酰肼 - 用于標(biāo)記醛和酮基團(tuán)
※ 羧酸 - 用于在碳二亞胺預(yù)活化后標(biāo)記胺或用于醇的 Steglich 酯化
※ 胺 - 用于標(biāo)記各種親電子化合物，例如活化酯
表 3. 活性香豆素和香豆素衍生物。
| 產(chǎn)品 | Chemical Reactivity | 活性基團(tuán) | Ex (nm) | Em (nm) | ε1 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| Alpha Fluor™ 350 NHS ester | Amine | NHS Ester | 343 | 441 | 19000 | 1 mg | |
| AMCA alkyne | Azide | Alkyne | 346 | 434 | 19000 | 1 mg | |
| AMCA azide | Alkyne | Azide | 346 | 434 | 19000 | 1 mg | |
| AMCA C2 maleimide | Thiol | Maleimide | 346 | 434 | 19000 | 5 mg | |
| AMCA ethylenediamine | Aldehyde, Carboxylic Acid, Ketone | Ethylenediamine | 346 | 434 | 19000 | 5 mg | |
| AMCA, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 346 | 434 | 19000 | 10 mg | |
| DEAC | Amine (after pre-activation with carbodiimides) | Carboxylic Acid | 411 | 472 | 40000 | 25 mg | |
| DEAC, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 411 | 472 | 40000 | 25 mg | |
| 7-Hydroxy-4-methylcoumarin-3-acetic acid, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 364 | 458 | 25000 | 25 mg | |
| 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic acid | Amine (after pre-activation with carbodiimides) | Carboxylic Acid | 352 | 407 | 25000 | 25 mg | |
| 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic acid | Amine (after pre-activation with carbodiimides) | Carboxylic Acid | 352 | 407 | 25000 | 250 mg | |
| 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic acid, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 352 | 407 | 35000 | 50 mg | |
| 7-Hydroxycoumarin-4-acetic acid, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 360 | 450 | 18000 | 25 mg | |
| Alpha Fluor™ 350 C5 maleimide | Thiol | Maleimide | 343 | 441 | 19000 | 1 mg | |
| iFluor™ 350 amine | Aldehyde, Carboxylic Acid, Ketone | Amine | 345 | 450 | 19000 | 1 mg | |
| iFluor™ 350 hydrazide | Aldehyde, Carboxylic Acid, Ketone | Hydrazide | 345 | 450 | 20000 | 1 mg | |
| iFluor™ 350 maleimide | Thiol | Maleimide | 343 | 441 | 19000 | 1 mg | |
| iFluor™ 405 amine | Aldehyde, Carboxylic Acid, Ketone | Amine | 403 | 427 | 37000 | 1 mg | |
| iFluor™ 405 hydrazide | Aldehyde, Carboxylic Acid, Ketone | Hydrazide | 403 | 427 | 37000 | 1 mg | |
| iFluor™ 405 maleimide | Thiol | Maleimide | 403 | 427 | 37000 | 1 mg | |
| MCA succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 322 | 381 | 15000 | 25 mg | |
| 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid | Amine (after pre-activation with carbodiimides) | Carboxylic Acid | 355 | 405 | 20000 | 1 g | |
| 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid | Amine (after pre-activation with carbodiimides) | Carboxylic Acid | 355 | 405 | 20000 | 5 g | |
| 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic acid, succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 355 | 405 | 25000 | 100 mg | |
| iFluor™ 350 succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 345 | 450 | 20000 | 1 mg | |
| iFluor™ 405 succinimidyl ester | Amine | Succinimidyl Ester | 403 | 427 | 37000 | 1 mg |
