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一、培養(yǎng)基核心成分及作用（按濃度排序）
成分               濃度（g/L）     功能
胰蛋白胨       10.0                主要碳源和氮源：由動物蛋白（如酪蛋白）經(jīng)胰酶消化制成，含豐富氨基酸、短肽，為目標(biāo)菌生長提供必需的氮元素、碳元素及生長因子，支持細(xì)菌大量繁殖。
酵母浸粉          5.0                   補充營養(yǎng)與生長因子：從酵母中提取，含 B 族維生素（如維生素 B1、B2）、核苷酸、小分子糖類等，可促進(jìn)細(xì)菌代謝，尤其對營養(yǎng)需求稍高的菌株起 "輔助生長"作用。
氯化鈉              5.0                   維持滲透壓平衡：模擬細(xì)菌自然生長環(huán)境（如人體體液、環(huán)境水體）的滲透壓，防止細(xì)菌因滲透壓劇烈變化導(dǎo)致細(xì)胞破裂或脫水，保證菌體正常形態(tài)和生理功能。

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二、關(guān)鍵理化參數(shù)（培養(yǎng)條件）
pH 值：7.3 ± 0.2（中性偏堿）：該 pH 范圍適配多數(shù)常見細(xì)菌（如大腸桿菌、沙門氏菌等腸道菌）的生長需求 —— 多數(shù)細(xì)菌適宜在中性或弱堿性環(huán)境中代謝，過酸或過堿會抑制酶活性，阻礙生長。
溫度：25℃：屬于 “中溫培養(yǎng)”，適用于環(huán)境微生物（如土壤、水體中的細(xì)菌）或部分非致病性細(xì)菌培養(yǎng)；若需培養(yǎng)人體來源的致病菌（如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌），通常調(diào)整為 35-37℃（模擬人體體溫）。

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三、培養(yǎng)基類型與適用場景
類型定位：屬于營養(yǎng)培養(yǎng)基（Nutrient Medium）
特點是成分簡單、營養(yǎng)全面，無選擇性（不抑制雜菌）、無鑒別性（不能區(qū)分不同菌種），核心作用是 “通用型增殖”—— 讓目標(biāo)菌（或混合菌群）在適宜條件下大量生長，為后續(xù)的分離、鑒定（如生化試驗、藥敏試驗）提供足夠菌量。

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典型使用場景：
環(huán)境微生物檢測：如水體、土壤中可培養(yǎng)細(xì)菌的計數(shù)或富集。
細(xì)菌純培養(yǎng)：對已分離的單一菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，用于制備菌懸液、保存菌種。
基礎(chǔ)生化試驗前的菌體制備：為糖發(fā)酵、氧化酶試驗等提供足量菌體

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LB肉湯使用方法

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一、LB 肉湯標(biāo)準(zhǔn)使用步驟
※ 稱量與溶解
準(zhǔn)確稱取 LB 肉湯干粉（含胰蛋白胨、酵母浸粉、氯化鈉等成分）20.0g，加入到裝有1000ml 蒸餾水（或去離子水，避免雜質(zhì)影響細(xì)菌生長）的潔凈燒杯中。
置于加熱設(shè)備（如電爐、磁力攪拌器）上，緩慢加熱并攪拌，直至干粉完全溶解（溶液呈澄清透明狀，無肉眼可見顆粒），避免局部過熱導(dǎo)致成分碳化。
※ 分裝操作：將溶解后的 LB 肉湯溶液，根據(jù)后續(xù)使用需求（如試管培養(yǎng)、三角瓶擴(kuò)大培養(yǎng)）分裝至無菌容器（如玻璃試管、錐形瓶）中。
※注 意事項：
若使用三角瓶，液體裝量不宜超過瓶容積的 1/2（例如 250ml 三角瓶裝液不超過 125ml），避免高壓滅菌時液體沸騰溢出，同時為后續(xù)細(xì)菌培養(yǎng)（尤其是搖瓶培養(yǎng)）預(yù)留足夠氧氣空間。
分裝后及時蓋上合適的塞子（如硅膠塞、棉塞），并包裹牛皮紙或 parafilm 膜，防止滅菌后污染。
※ 高壓滅菌（核心滅菌環(huán)節(jié)）
將分裝好的 LB 肉湯放入高壓蒸汽滅菌器中，設(shè)置滅菌參數(shù)：溫度 121℃、壓力 0.1MPa（1kg/cm²）、時間 15 分鐘。
滅菌原理：121℃的飽和蒸汽可穿透微生物的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，破壞蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)，徹底殺滅培養(yǎng)基中可能存在的細(xì)菌、芽孢、真菌等微生物及孢子，避免雜菌污染。
滅菌后操作：待滅菌器壓力降至 0MPa、溫度降至室溫后，緩慢打開排氣閥，取出培養(yǎng)基，置于無菌環(huán)境（如超凈工作臺）中冷卻至室溫，即可備用。

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二、關(guān)鍵操作注意事項
※ 稱量精度
需使用精度為 0.1g 的電子天平稱量干粉，若稱量偏差過大（如不足 20g），會導(dǎo)致培養(yǎng)基營養(yǎng)濃度不足，影響細(xì)菌生長速度；若過量，則可能因滲透壓過高抑制菌體增殖。
※ 溶解細(xì)節(jié)
嚴(yán)禁直接將干粉倒入沸水中溶解，高溫會使胰蛋白胨、酵母浸粉中的蛋白質(zhì)變性凝固，形成不溶性沉淀，導(dǎo)致培養(yǎng)基營養(yǎng)失效。需從常溫開始緩慢加熱攪拌。
※ 滅菌
溫度低于 121℃或時間短于 15 分鐘：無法徹底殺滅耐熱芽孢（如枯草芽孢桿菌芽孢），易導(dǎo)致后續(xù)培養(yǎng)時雜菌污染。
溫度過高或時間過長：會破壞培養(yǎng)基中的 B 族維生素（來自酵母浸粉）、氨基酸等營養(yǎng)成分，降低培養(yǎng)基的營養(yǎng)效力，甚至產(chǎn)生有害物質(zhì)抑制細(xì)菌生長。
※ 冷卻與儲存：滅菌后的 LB 肉湯需冷卻至室溫后再使用，若直接接入菌種，高溫會殺死菌體；若暫不使用，可密封后置于 4℃冰箱冷藏保存，儲存時間一般不超過 1 周，避免營養(yǎng)成分降解或二次污染。

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