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凝膠電泳和SDS-PAGE之間的區(qū)別

Release Time:2022-09-27

凝膠電泳與SDS Page的主要區(qū)別
凝膠電泳是一種在電場中分離大分子的技術(shù)。 分子生物學(xué)中常用的方法是根據(jù)分子大小從混合物中分離 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)。 SDS Page 是一種凝膠電泳,用于根據(jù)蛋白質(zhì)的大小從蛋白質(zhì)混合物中分離蛋白質(zhì)。 凝膠電泳是一個術(shù)語,用于指用于 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)分離的常規(guī)技術(shù),而 SDS 頁是一種凝膠電泳。 這是凝膠電泳和 SDS Page 之間的主要區(qū)別。
什么是凝膠電泳?
凝膠電泳是實驗室中用于從混合物中分離帶電分子(如 DNA、RNA、蛋白質(zhì)等)的常用技術(shù)。凝膠用于凝膠電泳。它充當分子篩。凝膠電泳中使用兩種類型的凝膠,即瓊脂糖和聚丙烯酰胺。凝膠和凝膠制劑的選擇是凝膠電泳中要考慮的重要因素,因為應(yīng)仔細控制凝膠的孔徑,以便通過凝膠電泳實現(xiàn)分子的良好分離。凝膠電泳具有連接到凝膠兩端的電場。凝膠的一端帶正電荷,而另一端帶負電荷。
DNA 和 RNA 是帶負電荷的分子。一旦它們從凝膠的負端加載到凝膠中并施加到電場中,它們就會通過凝膠孔遷移到凝膠的帶正電端。遷移的速度取決于分子的電荷和大小。較小的分子比較大的分子更容易通過凝膠孔遷移。因此,較小的分子在凝膠中行進很長的距離,而較大的分子則在很短的距離內(nèi)行進。為了觀察分子在凝膠上的移動,使用了特殊類型的染料。電場施加一定時間后停止,以防止分子丟失并使分子保持在其行進位置。在凝膠中可以觀察到不同的條帶。這些條帶代表不同大小的分子。因此,凝膠電泳可用于根據(jù)分子大小區(qū)分分子。
凝膠電泳作為分子生物學(xué)中的一種制備技術(shù)被納入各種技術(shù)中,例如 PCR、RFLP、克隆、DNA 測序、Southern 印跡、基因組作圖等。

圖 1:瓊脂糖凝膠電泳
什么是SDS Page?
十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS Page)是一種用于分離蛋白質(zhì)的凝膠電泳。當使用凝膠電泳分離蛋白質(zhì)時,需要進行特殊處理,因為蛋白質(zhì)不像 DNA 和 RNA 那樣帶負電,也不會向正端或負端遷移。因此,在凝膠電泳之前,蛋白質(zhì)會變性并帶有負電荷。它是使用一種稱為十二烷基硫酸鈉 (SDS) 的清潔劑來完成的。使用 SDS 和聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質(zhì)的凝膠電泳稱為SDS Page。這種技術(shù)常用于生物化學(xué)、遺傳學(xué)、法醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)。
在SDS Page,蛋白質(zhì)與 SDS混合。 SDS 將蛋白質(zhì)展開成線性形狀,并用與其分子量成正比的負電荷包裹它們。由于負電荷,蛋白質(zhì)分子向凝膠的正電荷端遷移并根據(jù)它們的分子量分離。在SDS Page中,聚丙烯酰胺用作凝膠的固體支持物。蛋白質(zhì)的實際分離主要取決于凝膠的性質(zhì)。因此,應(yīng)仔細制備聚丙烯酰胺凝膠,并應(yīng)使用正確濃度的聚丙烯酰胺。聚丙烯酰胺凝膠比瓊脂糖凝膠具有更高的分辨率。因此,SDS Page 被認為是一種用于蛋白質(zhì)分離的高分辨率技術(shù)。
SDS Page 是一種變性凝膠電泳。它在蛋白質(zhì)分析方面有很大的局限性。由于 SDS 在分離之前使蛋白質(zhì)變性,因此不允許檢測酶活性、蛋白質(zhì)結(jié)合相互作用、蛋白質(zhì)輔助因子等。
凝膠電泳和 SDS Page 有什么區(qū)別?

凝膠電泳與SDS Page總結(jié)
凝膠電泳是基于 DNA、RNA 和蛋白質(zhì)的大小和電荷分離和分析的常用技術(shù)。 凝膠電泳主要有兩種類型,即瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳。 瓊脂糖凝膠主要用于核酸分離; 當需要更高的分辨率時,可以使用聚丙烯酰胺凝膠。 SDS Page 是一種凝膠電泳,通常用于分離復(fù)雜的蛋白質(zhì)混合物。 它被認為是一種高分辨率的蛋白質(zhì)分離技術(shù)。 這就是凝膠電泳和 SDS Page 的區(qū)別。


文獻:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig, and David H. Petering. “Native SDS-PAGE: High Resolution Electrophoretic Separation of Proteins With Retention of Native Properties Including Bound Metal Ions. www.ncbi.nlm.nih.gov. N.p., May 2014. Web. 7 Apr. 2017
2. Stellwagen, Nancy C. “Electrophoresis of DNA in agarose gels, polyacrylamide gels and in free solution.” Electrophoresis. U.S. National Library of Medicine, June 2009. Web. 07 Apr. 2017


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