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花青素(Cyanines)系列染料

Release Time:2022-02-15

花青素(Cyanines)染料介紹:

花青素(Cyanines)是在兩個具有離域電荷的氮原子之間含有聚甲炔橋的分子:花青素(Cyanines)染料主要用于通過光學(xué)方法監(jiān)測細(xì)胞、細(xì)胞器和囊泡中的膜電位差。用于通過光學(xué)方法監(jiān)測細(xì)胞、細(xì)胞器和囊泡中的膜電位差。這些對電位敏感的染料在分子結(jié)構(gòu)、電荷和通過膜的滲透性方面有所不同。根據(jù)染料的不同,涉及到與膜的電位依賴性結(jié)合以及二聚體和更高聚集體的形成。

由于其結(jié)構(gòu),花青素具有非常高的消光系數(shù),通常超過 100,000 Lmol-1cm-1。不同的取代基可以控制發(fā)色團(tuán)的特性,例如吸收波長、光穩(wěn)定性和熒光。例如,吸光度和熒光波長可以通過選擇聚甲炔橋長度來控制:較長的花青素具有較高的吸光度和發(fā)射波長,直至近紅外區(qū)域。

許多花青素染料已用于生命科學(xué)應(yīng)用。一系列噻唑和惡唑染料已被用作 DNA 和蛋白質(zhì)結(jié)合染料(如 TOTO、YOYO、Stains All 等)。但最流行的用于生命科學(xué)研究的花青染料是由卡內(nèi)基梅隆大學(xué)的 Alan Wagoner 及其同事在 1990 年代初推出的。這些染料是對自 1970 年代以來用于血管造影的花青染料吲哚菁綠 (ICG) 的改進(jìn),它們都含有兩個位于聚甲炔鏈兩側(cè)的吲哚啉環(huán)。發(fā)現(xiàn)這些染料對生物分子的非特異性結(jié)合較低,并且由于其巨大的消光系數(shù)和良好的量子產(chǎn)率而具有明亮的熒光。一旦獲得專利,這些分子在 CMU 專利到期后現(xiàn)在處于公共領(lǐng)域,并且可以從 Lumiprobe 購買,作為各種反應(yīng)性衍生物進(jìn)行研究和商業(yè)用途,例如 NHS 酯、馬來酰亞胺、用于點擊化學(xué)的疊氮化物和其他衍生物。
花青素染料有兩種:非磺化花青和磺化花青。對于許多應(yīng)用,它們是可以互換的,因為它們的光譜特性幾乎相同。磺化和非磺化染料均可用于標(biāo)記生物分子,例如 DNA 和蛋白質(zhì)。染料之間的區(qū)別在于它們的溶解度:磺基染料是水溶性的,它們在水性環(huán)境中不使用有機(jī)助溶劑進(jìn)行標(biāo)記。它們在水中不易聚集。在某些情況下,需要一種花青(參見下面的磺化與非磺化花青素部分)。
 
非磺化花青素
可用的非磺化染料包括 Cy3、Cy3.5、Cy5、Cy5.5、Cy7 和 Cy7.5。 Cy® 代表“花青”,第一個數(shù)字表示二氫吲哚基團(tuán)之間的碳原子數(shù)。 Cy2 是惡唑衍生物而不是吲哚寧,是該規(guī)則的一個例外。 后綴 0.5 用于苯并稠合花青。 結(jié)構(gòu)的變化可以改變分子的熒光特性,并用幾種熒光團(tuán)覆蓋可見光和近紅外光譜的最重要部分。

大多數(shù)非磺化花青素的衍生物(酰肼和胺的鹽酸鹽除外)的水溶性較低。 當(dāng)這些分子用于生物分子標(biāo)記時,需要使用有機(jī)助溶劑(5-20% 的 DMF 或 DMSO)以實現(xiàn)有效反應(yīng)?;ㄇ嗨厝玖蠎?yīng)先溶解在有機(jī)溶劑中,然后加入生物分子(蛋白質(zhì)、肽、氨基標(biāo)記的DNA)在適當(dāng)?shù)乃跃彌_液中的溶液中。 當(dāng)偶聯(lián)有效發(fā)生時,染料會在沉淀之前發(fā)生反應(yīng)。

非磺化花青素的熒光性質(zhì)對溶劑和周圍環(huán)境的依賴性很小。
磺化花青素

磺化花青素包括額外的磺基,其有助于染料分子在水相中的溶解。 帶電荷的磺酸鹽基團(tuán)可減少染料分子和重標(biāo)記綴合物的聚集。
目前可用的磺化花青包括磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7。

磺化花青素是高度水溶性的。 使用這些試劑進(jìn)行標(biāo)記不需要有機(jī)助溶劑。
花青素(Cyanines)染料產(chǎn)品
 
Cy3.5參數(shù)
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
非磺化Cy3 555nm 570nm 150000 0.31
磺化Cy3 550nm 564nm 162000 0.1

Cy3系列產(chǎn)品:
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
sulfo-Cy3 NHS ester Sulfo-Cyanine3 NHS ester
maleimide Sulfo-Cyanine3 maleimide
azide Sulfo-Cyanine3 azide
alkyne Sulfo-Cyanine3 alkyne
carboxylic acid Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid
Cy3 NHS ester Cy3 NHS ester
maleimide Cy3 maleimide
azide Cy3 azide
alkyne Cy3 alkyne
hydrazide Cy3 hydrazide
amine Cy3 amine
carboxylic acid Cy3 carboxylic acid

Cy3.5參數(shù)表
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy3.5 586nm 606nm 116000 0.35
磺化Cy3.5 584nm 604nm 116000 0.35

Cy3.5系列產(chǎn)品:
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
Cy3.5 NHS ester Cy3.5 NHS ester
azide Cy3.5 azide
carboxylic acid Cy3.5 carboxylic acid

Cy5參數(shù)表
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy5 640nm 664nm 250000 0.2
磺化Cy5 649nm 672nm 271000 0.28

Cy5系列產(chǎn)品:
 
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
sulfo-Cy5 NHS ester Sulfo-Cyanine5 NHS ester
maleimide Sulfo-Cyanine5 maleimide
azide Sulfo-Cyanine5 azide
alkyne Sulfo-Cyanine5 alkyne
carboxylic acid Sulfo-Cyanine5 carboxylic acid
Cy5 NHS ester Cy5 NHS ester
maleimide Cy5 maleimide
azide Cy5 azide
alkyne Cy5 alkyne
hydrazide Cy5 hydrazide
amine Cy5 amine
carboxylic acid Cy5 carboxylic acid

Cy5.5參數(shù)表
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy5.5 680nm 698nm 209000 0.2
磺化Cy5.5 678nm 706nm    

Cy5.5 系列產(chǎn)品:
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
Cy5.5 NHS ester Cy5.5 NHS ester
maleimide Cy5.5 maleimide
azide Cy5.5 azide
alkyne Cy5.5 alkyne
hydrazide Cy5.5 hydrazide
amine Cy5.5 amine
carboxylic acid Cy5.5 carboxylic acid
 
Cy7參數(shù)表
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy7 740nm 770nm 199000 0.3
磺化Cy7 748nm 774nm 240600 -/-

Cy7系列產(chǎn)品:
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
sulfo-Cy7 NHS ester sulfo-Cy7 NHS ester
azide sulfo-Cy7 azide
amine sulfo-Cy7 amine
carboxylic acid sulfo-Cy7 carboxylic acid
Cy7 NHS ester Cy7 NHS ester
maleimide Cy7 maleimide
azide Cy7 azide
alkyne Cy7 alkyne
hydrazide Cy7 hydrazide
amine Cy7 amine
carboxylic acid Cy7 carboxylic acid

Cy7.5參數(shù)表
  激發(fā)峰(Ex) 發(fā)射峰(Em) 消光系數(shù)(εmax) 量子產(chǎn)率(Φ)
Cy7.5 788nm 808nm 223000  

Cy7.5系列產(chǎn)品:
熒光母核 標(biāo)記對象 熒光染料產(chǎn)品
Cy7.5 NHS ester Cy7.5 NHS ester
maleimide Cy7.5 maleimide
azide Cy7.5 azide
alkyne Cy7.5 alkyne
hydrazide Cy7.5 hydrazide
amine Cy7.5 amine
carboxylic acid Cy7.5 carboxylic acid
 
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