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熒光探針(簡介,定義,應(yīng)用)

Release Time:2022-01-18

熒光探針簡介:
熒光探針在很多情況下被描述為 熒光化學傳感器,熒光探針是吸收特定波長的光并發(fā)射不同波長的光的分子,通常是更長的波長(稱為熒光的過程),用于研究生物樣品。 這些分子,也稱為熒光團,可以附著在目標分子上,作為熒光顯微鏡分析的標記。

熒光團的熒光分子對光有明顯的反應(yīng)。 每個熒光團都有不同的特征,可用于確定用于給定應(yīng)用或?qū)嶒炏到y(tǒng)的熒光團。 細胞中的一些蛋白質(zhì)或小分子是天然熒光的; 這稱為內(nèi)在熒光或自發(fā)熒光 [例如,綠色熒光蛋白 (GFP)]。 蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)或小分子可以用外在熒光團(一種熒光染料)標記,它可以是小分子、蛋白質(zhì)或量子點(圖 1)。 本文討論了當前使用的各種熒光化合物的缺陷和問題。

熒光探針在分子生物學研究和開發(fā)中越來越受到重視。 許多科學家正在醫(yī)學、制藥和綠色生物技術(shù)等領(lǐng)域研究這些閃耀的自然奇觀。 您了解得越多,您就可以更好地在研究中使用熒光探針。
熒光探針定義
術(shù)語“探針”通常用于描述熒光寡核苷酸。最常用的 DNA 探針是雙標記的,因此由三個不同的部分組成:
※ 負責特定 DNA 識別的 5 到 35 bp 之間的單鏈 DNA
※ 在特定波長發(fā)射熒光的報告染料
※ 一種猝滅劑,在一定狀態(tài)下吸收報告染料發(fā)出的光。
 
過程都是物理學
DNA 探針用適當?shù)膱蟾嫒玖虾外鐒┡鋵M行標記,以利用 Förster 共振能量轉(zhuǎn)移(簡稱 FRET)。

讓我們仔細看看熒光的另一面:
熒光被定義為“響應(yīng)光照射而自發(fā)發(fā)射的光”。換言之,電子在光激發(fā)后進入更高能量的狀態(tài)。然而,這種狀態(tài)是高度不穩(wěn)定的。
一旦被激發(fā)的電子返回到較低的能量狀態(tài),多余的能量就會以光子的形式發(fā)射出來。
熒光團有彩虹的所有顏色,取決于它們發(fā)出的能量。

大小事項
對于短 DNA 探針,報告染料和猝滅劑的分離發(fā)生在聚合酶水解探針并釋放報告染料之后。
需要水解的探針稱為 TaqMan 探針,基于具有 3'-5' 核酸外切酶活性的 TaqMan 聚合酶。
熒光探針使用:
探針的主要用途之一是可視化用于定量實時 PCR (qPCR) 的目標 DNA 序列,由于熒光探針,它成為一種極其通用的工具。
定量 PCR 也可以使用與 dsDNA 結(jié)合的熒光染料進行,在 PCR 期間其數(shù)量會增加。然而,這些染料與任何 dsDNA 結(jié)合,不會將目標 DNA 與其他 DNA 鏈區(qū)分開來。相反,探針顯示出更高的特異性,因為特異性寡核苷酸部分僅在目標序列上退火。
雜交探針允許進一步的應(yīng)用,除了病原體的定量外,還有突變檢測、熔點分析和原位雜交。
此外,探針可以用不同的報告染料標記,從而允許多重 PCR 在單個反應(yīng)中檢測多個目標。
熒光探針產(chǎn)品:
序號 CAS 名稱
1 75168-11-5 10-壬基溴代吖啶橙
2 288399-07-5 Bis(2,2prime-bipyridine)-(5-isothiocyanato-phenanthroline)ruthenium bis(hexafluorophosphate)
3 14696-39-0 1,1'-二乙基-3,3,3',3'-四甲基吲哚菁碘化物
4 33984-50-8 4-(4-甲氧基芐氨基)-7-硝基苯并呋喃
5 304684-77-3 Exo2
6 12125-01-8 氟化銨
7 3893-10-5 1-(4-Methoxyphenyl)-6-phenylhexatriene
8 14806-50-9 3,3'-Diethyloxadicarbocyanine Iodide
9 53332-27-7 Dansyl-L-alanine cyclohexylammonium salt
10   Zinbo-5
11 90-30-2 N-苯基-1-萘胺
12 198-55-0
13 905-96-4 3,3'-二乙基氧雜羰花青碘
14 18468-46-7 N,N'-Didansyl-L-cystine
15 28217-22-3 alpha-Dansyl-L-arginine hydrochloride
16 76421-73-3 Chlorobimane
17 76877-34-4 7-Diethylamino-3-[4-(iodoacetamido)phenyl]-4-methylcoumarin
18 146441-73-8 Ru(bpy)2(phen-5-NH2)(PF6)2
19 148942-72-7 5-溴甲基熒光素
20 160291-54-3 7-Diethylamino-3-[N-(3-maleimidopropyl)carbamoyl]coumarin
21 321895-92-5 8-(4-Nitrophenyl) Bodipy
22 359010-69-8 ROS Probe, HPF
23 474943-07-2 N-(NBD-Aminolauroyl)safingol
24   CruzFluor sm 1 succinimidyl ester
25   CruzFluor sm 5 amine
26   CruzFluor sm 5 succinimidyl ester
27 514-73-8 3,3'-二乙基硫二碳碘化氰
28 53313-85-2 6-(p-Toluidino)-2-naphthalenesulfonic Acid Sodium Salt
29 61389-30-8 Oxonol V細胞膜電位熒光探針
30 443302-08-7 ZnAF-1F
31   4-Amino-2,6-dimethyl-8-(2prime-deoxy-3prime,5prime-di-O-toluoyl-alpha,beta-D-ribofuranosyl)-7(8H)-pteridone
32   Fluorescent red 681 reactive
33 518-67-2 溴甲菲啶
34 5852-10-8 7-羥基-4-甲基香豆素-3-乙酸
35 5981-09-9 三(4-氨基苯基)胺
36 19759-70-7 Tris(p-isocyanatophenyl)amine
37 51987-57-6 8-Isothiocyanatopyrene-1,3,6-trisulfonic acid trisodium salt
38 64701-47-9 1-Pyrenedecanoic acid
39 72642-30-9 (1-Naphthyl)ethyl Methacrylate
40 73413-78-2 N-(7-Nitrobenzofurazan-4-yl)phallacidin
41 88969-31-7 Oxonol 595
42 135367-81-6 4-(p-Dihexadecylaminostyryl)-N-methylquinolinium iodide
43 208462-25-3 Bodipy 8-Chloromethane
44 1260635-77-5 Coumarin Suberoylanilide Hydroxamic Acid
45 55779-48-1 腔腸素;鈣離子熒光探針腔腸素
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